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无需扫描! SPINDLE可实现3D高精度单分子定位成像!

更新时间:2022-08-01 点击次数:1310
不可打印机扫描! SPINDLE可保持3D高精密度较单团伙精准定位成相!


简单介绍


超辨别好坏率显微成相就是类型是需要使探讨人工是需要“突破"光电器件光学电子显微镜观察衍射心里障碍的办法,在该类型办法中辨别好坏率高的系统设备为光启用手机导航导航分析显微系统设备(PALM)。这个办法局限于于在数万帧中对一个团伙的随意子集做出手机导航导航分析(SMLM),并将这个自身的手机导航导航分析重新构建为一个超辨别好坏率图文。老式的手机导航导航分析光学电子显微镜观察需要在跨页要素上做出10~20nm的准确成相,要为推动更多的手机导航导航分析标准,标准光学电子显微镜观察显卡配置具更多信噪比的准确度发现器。尽可能跨页辨别好坏率令人感动好的印象印象深刻,但老式的2D SMLM仍一般 由于缺乏支承辨别好坏率。


法国Double Helix Optics单位的SPINDLER系3D光学元件体视显微镜显像包块与3DTRAXRapp相通过,可在二维撸点上实行高控制精度、亚衍射極限标记,并拥有加密的的淬硬层显像特性。SPINDLE采用了紧密光学元件器材开发,可与世上边在售的专业光学元件体视显微镜无缝隙模块化,并具备qian 所wei 有的侧向和载荷紧密显像女子组合。顾客可利用中应的技术应用的选择为宜的相位掩模本以实行软件设计的淬硬层比率、反射光谱和信噪比等数据对点扩散作用数学函数(PSF)的整合,更必要的是,SPINDLE可在不必扫描拍照的时候下到每张图面中国上将以往显像软件的景深加大10倍。


在中心句中,咱们展示出了怎么才能将SPINDLE显像模式与传统与现代荧光显微镜观察结合实际适用以在那些几个向度(x、y、z)上改变亚衍射加速度显像。SPINDLE可与什么高品水平的科学有效单反相机兼容,尽管是emccd或者是scmos能以供应wifi定位显微镜观察流程的高信噪比图相。


选择SPINDLE和DH-PSF相位掩范例对细胞核微管去二维超粪便影像


在这段话中,企业证明信了安全实用SPINDLE单绿色通道引擎可控制高精密度较、大强度的超分别率恢复。已知1已知,安全实用Double Helix (DH-PSF) 的相位掩模本与SPINDLE单碳原子标记体视显微镜应用程序融入。控制系统将单独碳原子散发的光分解成两根光瓣,也能 寻找到两根光瓣的平台来搜索闪光点的横着(x-y)部位;两光瓣当中的偏角代码了闪光点的载荷(z)部位。他们减半的讯息将促使在横着和载荷规格上用很高的精密度较(<20nm)实施超分别率恢复。不但,SPINDLE优化了碳原子可标记的景深,种灵敏度高度和优化强度成相的融入也能以显长挺高的z轴分别率以持续比较多的数据库。


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图1:为单分子结构手机定位显微影像能力(SMLM)能力的具有可互相交换相位掩模支撑杆的SPINDLE方案


为了能让教学片SPINDLE的工作的操作过程,你们适用的NikonN-STORM光学显微镜结合在一起Photometrics Prime 95B手机对被AlexaFluor 647偶联微管淀粉酶抵抗能力标示的Cos7内部做好了三维显像。对于那些该原材料,你们适用的通过调整的相位掩模本,该掩模本可与远红外吸光度染色剂和1.49 NA的100倍物镜加上适用的。原材料在640 nm机光连着照晒放到Prime95B上三维显像,报光時间为30 ms。适用的3DTRAX手机app对单射点做好市场定位,并将结论拷贝到ImageJ插件怎么安装Thun-der STORM。适用的归一化高斯手段重造图案,并适用的ImageJ搜寻表“Spectrum"以茶汤颜色对z长度做好商品编号。


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图2:单独某个100nm珠在Prime95B上动用SPINDLE在焦水平面设计(0µm)和焦水平面设计右左上方(+1µm)和左上方(-1µm)2um处的成相图


改建的最终带有小于200万个品牌定位,并呈现Cos7癌細胞中微管的30µmx30µm眼光、强度小于2.1µm的区间(图3左)。强度以样色商品代码,癌細胞底边为颜色/紫,表层左右为呈黄色/橘色。拖动的插图图片呈现微管在一定程度强度区间内受到了非常好的改建(图3,右)。等动态数据凸现了实用Double Helix SPINDLE模快带去的括展景深成相和高横排和径向辩别率。


运用Double Helix 3DTRAX手机软件展开高准确度三维立体位置定位


Double Helix 3DTRAX电脑软件是个ImageJ/FIJI插件”,其可以在侧向和轴上以亚衍射加速度高精准度位置单独原子核。3DTRAX还便用克垃美-拉奥临界点(CRLB)5计算公式了各个位置原子核的高精准度值。该计算公式立于各个位置的信噪比。


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图3:动用SPINDLE(R)和Prime 95B显像的微管二维超辩认率重新修建图。左图:Cos7神经细胞免疫力印染的微管蛋白质,色彩简码深入。右图:左下图像文件的放小空间区域,体现了深入超出2μm的微管。图由Double Helix Optics能提供。均CRLB值双重约10nm,支承约20nm(图3)


总体


Double Helix的SPINDLE超区分率3D显微影像模组、相位掩模和3DTRAX软文的组合构成可实现了高精确度大厚度3D图像影像、关注和数值。除此利用中,让我们在亚神经元设备构造的3D图像超区分率翻修中展示英文了约10nm的横截面精确度和20nm的心轴精确度。SPINDLE系统性成品为研究方案人提供数据了厉害的方式集,可加快对密切微生物系统性中子设备构造、亚神经元和神经元内能够 功用的解释。


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图4:横截面和载荷精确。主要用于从建图2如下图所示彩色图像的分析精确值。精确值由3DTRAX免费软件依照其信噪比采用每次反射器的Cramer-Rao下界5算出确定。分析数显仪表示在y轴上,精确值(nm)界面显示在x轴上


相关资料;

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关于幼儿园Double Helix Optics

荷兰Double Helix Optics是一个家处于荷兰科罗拉多州博尔德的求算光电技巧大公司。Double Helix Optics使用其zhuan利的双锥齿轮减速机光水利成相技巧规划规划设计下一带高画质等级3D成相商品,多方面操作在生命是什么有效和的原材料有效范围以实现了对亚组织细胞设计3D的成相、定位和数值。Double Helix的SPINDLE系例成相摸块与可锁定的相位掩模库包括代替折算改造和深入分析的APP相通过,提高认识为公司的用户还有软件应用的具体化实际情况提拱高产品质量量的3D成相技术应用。


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